產品推薦│耐熱SSB助您的PCR產量更高更快
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在PCR擴增實驗過程中,雙鏈DNA解鏈是必不可少的一步,解開的單鏈DNA會重新配對形成雙鏈DNA或自身形成發夾結構,又或者被降解,導致不能穩定擴增DNA。為解決這個問題,單鏈DNA結合蛋白(single-stranded DNA-binding protein, SSB)就應運而生了。
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SSB具有高度的親和力,能夠迅速結合到DNA 的單鏈上,形成SSB-DNA復合體防止DNA再結合成雙鏈,使螺旋二聚體變得不穩定,促進引物和聚合酶與目標DNA的結合,從而提高PCR的產量。正因如此,SSB蛋白被廣泛地用于各種基于PCR技術的PCR、RT-PCR、DNA測序等領域。
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圖1.SSB結合ssDNA示意圖
(圖片源自:DOI: 10.1038/4611067a.)
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PCR擴增必須經歷高溫變性過程,這要求SSB蛋白具有熱穩定性,能夠在高溫條件下仍然保持活性。為滿足這一需求,翌圣通過ZymeEditor?酶改造平臺對來源于嗜熱細菌的SSB進行重組表達,獲得高純度耐高溫的SSB(Cat#14561ES)。翌圣SSB能夠在高溫條件下保持穩定的結構與功能,具有提高PCR反應的產量和特異性、提高RT-PCR中反轉錄的產量和延伸能力以及改善強二級結構區域的DNA測序的特點。
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部分數據展示
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01
無外切酶、切口酶殘留
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?將0.5、2 μg的SSB分別與底物DNA在37℃孵育4 h,瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA譜帶不發生變化,表明SSB無外切酶及切口酶殘留。

圖2. 外切酶和切口酶殘留檢測
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02
無RNase殘留
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將0.5 μg的SSB與底物RNA在37℃孵育4 h,瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA譜帶不發生變化,表明SSB無RNase殘留。

圖3. RNase殘留檢測
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