在生物醫(yī)學研究領(lǐng)域,蛋白純化是探索生命奧秘的關(guān)鍵技術(shù)。然而,傳統(tǒng)的純化方法往往使普通的蛋白純化面臨著低效率、高成本的困境,對于結(jié)構(gòu)復雜但功能多樣的膜蛋白(蛋白結(jié)構(gòu)學的重點研究對象,在細胞膜中低豐度表達且對環(huán)境敏感),傳統(tǒng)的純化方法更是使純化過程困難重重。
如今,翌圣生物憑借其卓越的研發(fā)實力,推出了全新升級的Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel(Cat#20584ES),為科研工作者帶來了一款高效、便捷的蛋白純化利器,即使難度較大的膜蛋白純化也能輕松解決。
產(chǎn)品性能
1、高特異性與高載量
精準捕獲目標蛋白,蛋白純化的關(guān)鍵優(yōu)勢
翌圣生物Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel(Cat#20584ES)采用高質(zhì)量的鼠源IgG2b單克隆抗體與4%高度交聯(lián)的瓊脂糖凝膠通過共價偶聯(lián)制備而成。這種獨特的制備工藝賦予了產(chǎn)品極高的特異性,能夠精準識別并結(jié)合帶有Flag標簽的融合蛋白,無論是Met修飾的N端Flag融合蛋白(Met-Flag-Protein),還是N端Flag 融合蛋白(Flag-Protein)、C 端 Flag 融合蛋白(Protein-Flag),都能輕松應對。
在膜蛋白純化中,這種特異性尤為重要,因為膜蛋白的結(jié)構(gòu)復雜,容易與其他蛋白發(fā)生非特異性結(jié)合。而Flag凝膠的高特異性能夠有效減少雜蛋白的干擾,確保純化后的膜蛋白具有高純度。此外,該凝膠具有較高的Flag標簽融合蛋白加載容量(至少為1.1 mg protein/mL凝膠),這意味著在膜蛋白純化過程中,即使目標蛋白的表達量較低,也能夠通過Flag凝膠實現(xiàn)高效的捕獲和純化。
2、高純度與高收率
助力下游應用
翌圣生物Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel(Cat#20584ES)雜蛋白非特異結(jié)合少,能夠有效減少雜質(zhì)蛋白的干擾。在純化后的蛋白樣品中,目標蛋白的純度極高,這對于后續(xù)的生物活性檢測、結(jié)構(gòu)解析等下游應用至關(guān)重要。高純度的蛋白樣品能夠提供更準確的實驗數(shù)據(jù),為科研人員的研究提供堅實的基礎(chǔ)。
3、優(yōu)化的實驗流程
輕松應對蛋白純化挑戰(zhàn)。
蛋白純化需要在溫和的條件下進行,以避免蛋白結(jié)構(gòu)的破壞(對于結(jié)構(gòu)復雜的膜蛋白尤其重要)。翌圣生物的Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel(Cat#20584ES)在設(shè)計上充分考慮了這一點,其儲存緩沖液為 TBS,含有50%甘油,pH 7.4,能夠在低溫下穩(wěn)定保存。這種緩沖液體系不僅保護了凝膠的活性,也為蛋白純化提供了溫和的環(huán)境。
在純化過程中,F(xiàn)lag凝膠的操作流程簡單且高效。為了方便客戶使用1×Flag多肽洗脫,產(chǎn)品包裝搭配贈送1×Flag多肽(Cat#20572ES),使得洗脫過程更加溫和(對蛋白幾乎沒有損傷)、高效便捷(進一步提升了實驗的便利性)。
4、多種規(guī)格且可分批發(fā)貨
滿足不同實驗需求。
考慮到不同實驗室的實驗規(guī)模和需求,翌圣生物提供了多種規(guī)格的Flag凝膠,包括 1 mL、5 mL、25 mL和100 mL。無論是小規(guī)模的初步探索,還是大規(guī)模的蛋白生產(chǎn),都能找到合適的規(guī)格。且大體積的年度采購,可允許客戶分批發(fā)貨,保證您在享受價格優(yōu)惠的同時,避免囤貨較多帶來的壓力。
實驗數(shù)據(jù)

圖1.Yeasen Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel純化Flag-N(a) 、Flag-M(b) 、Flag-C(c) 低表達量蛋白結(jié)果跑膠圖

圖2.Yeasen(a) PK進口品牌S*(b)、品牌G*(c)Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel純化低表達量蛋白(比如膜蛋白)結(jié)果對比測試跑膠圖
結(jié)論
1、 Yeasen Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel(Cat#20584ES)特異性高,并能結(jié)合多種位置的flag標簽(N端Flag融合蛋白,Met修飾的N端Flag融合蛋白,C端Flag融合蛋白)。
2、在目的蛋白表達量極低的條件下(比如膜蛋白), Yeasen Anti-DYKDDDDK (Flag) Affinity Gel (Cat#20584ES)得到的目的蛋白得率、純度明顯優(yōu)于競品,且使用Yeasen搭配贈送的1×Flag多肽(Cat#20572ES)洗脫效果更佳。
Flag標簽融合蛋白完整解決方案
重組腸激酶
Cat#20395ES
特定的蛋白酶,切割前面含有四個天冬氨酸的賴氨酸羧基端位點:Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,DDDDK是八肽Flag標簽(DYKDDDDK)的一部分。重組腸激酶(rEK)的使用可以輕松去除融合蛋白的Flag標簽,是研究天然蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的理想工具。
Anti-Flag純化磁珠
Cat#20785ES
一種聚合物磁性微球,由高質(zhì)量的鼠源抗DYKDDDDK(Flag)單克隆抗體與平均粒徑約為70 μm的瓊脂糖磁珠通過共價偶聯(lián)制備,可通過磁性分離直接從生物樣品中一步純化出高純度的Flag融合蛋白。
Anti-Flag免疫磁珠
Cat#20565ES
一種聚合物磁性微球,由高質(zhì)量的鼠源抗DYKDDDDK (Flag) 單克隆抗體與粒徑為200 nm的硅基磁珠通過共價偶聯(lián)制備,可用于帶有Flag標簽的蛋白免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。同時提供Flag標簽蛋白免疫(共)沉淀試劑盒(Cat#20765ES),包含實驗所需必要試劑,更方便客戶直接使用。
產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品定位 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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蛋白純化凝膠 |
Anti-DYKDDDDK(Flag) Affinity Gel Anti-Flag親和純化凝膠 |
1 mL/5 mL/ 25 mL/100 mL |
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洗脫多肽 |
Flag-tag Peptide(Flag-tag多肽) |
5 mg |
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標簽切割 |
RecombinantBovineEnterokinase,His,ExpressedinYeast 酵母表達重組牛腸激酶(His標簽) |
100 U/500 U/ 5000 U |
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蛋白純化磁珠 |
Anti-DYKDDDDK(Flag)MagAgarose Beads Anti-Flag純化磁珠 |
1 mL/5 mL |
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免疫磁珠 |
Anti-DYKDDDDK (Flag) MagBeads Anti-flag免疫磁珠 |
500 μL/1 mL/ 5 mL |
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免疫沉淀 試劑盒 |
Anti-DYKDDDDK(Flag)IP/Co-IP Kit Flag標簽蛋白免疫(共)沉淀試劑盒 |
40T |
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標簽抗體 |
Flag-Tag(DYKDDDDK),Mouse mAb小鼠抗Flag-Tag(DYKDDDDK)單克隆抗體 |
20 μL/100 μL/ 1 mL/5 mL |
