什么狀態(tài)下菌體質(zhì)粒DNA充分釋放？
如何用試劑盒提取出質(zhì)量更好的質(zhì)粒?
看了上一期的“滿滿的干貨（一）”，大家對于質(zhì)粒DNA的濃度分析應(yīng)該會有一定程度的了解，那么下面首先給大家介紹一下，如何用試劑盒提取出質(zhì)量更好的質(zhì)粒。
首先，質(zhì)粒提取的好壞，除了對吸附柱特異性要求以外，操作過程也非常重要，比如菌體的裂解程度，直接導(dǎo)致質(zhì)粒DNA釋放完全釋放，很多人會在裂解這一步無法判斷自己是否裂解徹底，下面結(jié)合圖片給大家簡單介紹一下。
菌液量較少時，溶液趨于透明狀態(tài)（非完全透明），即停止裂解，避免裂解過度。
菌液量較大時，菌體會裂解到半透亮狀態(tài)（輕微渾濁），此時可以延長下裂解時間，或者適當(dāng)增加裂解液的用量，當(dāng)對著燈光觀察，液體內(nèi)部無霧狀或渾濁狀沉淀出現(xiàn)，整體成均一性的透亮狀態(tài)（非透明），即停止裂解。
以上圖片為裂解充分和不充分的結(jié)果對比。
以上是展示的索萊寶產(chǎn)品所提取的高質(zhì)量質(zhì)粒電泳圖例。
通過測定不同廠家試劑盒提取的質(zhì)粒濃度，發(fā)現(xiàn)Q公司的質(zhì)粒濃度最高，但經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，結(jié)果條帶亮度不如Solarbio和T公司，而且A260/A280>2.0，說明有RNA污染，導(dǎo)致濃度偏高。因此可以說明必須將濃度和電泳結(jié)果一塊對比才可以確定質(zhì)粒的質(zhì)量。
索萊寶質(zhì)粒提取試劑盒產(chǎn)品列表
|
貨號 |
名稱 |
|
D1100 |
質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
|
D1110 |
質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
|
D1120 |
革蘭氏陽性菌質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
|
D1130 |
革蘭氏陽性菌質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
|
D1140 |
去內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
|
D1150 |
去內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒 |
|
D1160 |
酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒 |
|
DM1100 |
質(zhì)粒小量提取試劑盒（磁珠法） |