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Masson 三色染色試劑盒的說明
? ? Masson 三色染色是結締組織染色知更鳥最經典的一種方法，是顯示組織中纖維的主要方法之一，是膠原纖維染色權威而經典的技術方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關：分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量容易穿透結構致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進入結構稀松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或***胺藍的分子量很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson 三色染色試劑盒的特點
◆染色穩(wěn)定；
◆分化時間短，1-2分鐘；
◆色彩清楚鮮艷；
◆使用范圍廣，適宜于組織的石蠟切片、冰凍切片等染色；
◆所染切片保存時間長且不易褪色。
Masson 三色染色試劑盒的組成成分：
試劑（A-1） 蘇木素染色液 25ml
試劑（A-2） 三氯化鐵水溶液 25ml
試劑（B） 鹽酸乙醇分化液 50ml
試劑（C） 氨水水溶液 50ml
試劑（D） 麗春紅酸性品紅染色液 50ml
試劑（E） 乙酸水溶液 50ml
試劑（F） ***鉬酸水溶液 50ml
試劑（G） ***胺藍染色液 50ml
注：臨用時取A1、A2等量混合，成為試劑A，不可預先配制后放置，因染色液的色素根與鐵會化合。形成不容性沉淀，等量混合后，一般24小時后失去人力。
主要成分：
試劑（A）:主要由蘇木素和三氯化鐵組成。
試劑（B）:主要由乙醇和鹽酸水溶液組成。
試劑（C）:主要由稀氨水水溶液組成。
試劑（D）:主要由麗春紅和酸性品紅組成。
試劑（E）:主要由乙酸水溶液組成。
試劑（F）:主要由***鉬酸水溶液組成。
試劑（G）:主要由***胺藍和弱酸組成。
操作步驟：
固定液應選用甲醛鹽溶液、中性福爾馬林試劑（10%，NBF）進行固定。
1、 切片脫蠟至水。
2、 試劑（A）染色5min-10min。
3、 試劑（B）分化、水洗。
4、 試劑（C）返藍、水洗。
5、 蒸餾水或者去離子水洗1min。
6、 試劑（D）染色5-10min。
7、 試劑（E）洗1min。
8、 試劑（F）洗1-2min
9、 試劑（E）洗1min。
10、直接放入試劑（G）中染色1-2min。
11、試劑（E）洗1min。
12、95%乙醇快速脫水。
13、無水乙醇（1）5-10秒。
14、無水乙醇（2）5-10秒。
15、無水乙醇（3）5-10秒。
16、二甲***（1）1-2分。
17、二甲***（2）1-2分。
18、二甲***（3）1-2分。
19、中性樹膠封固。
染色結果：細胞核呈藍色、胞漿、肌肉、紅細胞呈紅色，膠原纖維/蛋白呈藍色。
注意事項：
1、 切片脫蠟應盡量干凈。
2、 組織固定起著非常重要的作用，使用不同的固定液或縮短染色時間
3、 經典masson三色染色中，常要求使用試劑A染核，也可用Harris 蘇木精染核，但Harris 蘇木精染核后切片顏色不夠鮮艷，因為色目的主要在于區(qū)分膠原纖維和肌纖維，一般也可以省略該染色步驟。
4、 試劑B的分化時間應該依據(jù)切片厚薄、組織的類別和新舊而定。
5、 試劑E為0.2%乙酸水溶液，可使色彩更清楚鮮艷、如果使用量大可自行配制。
6、 用試劑F分化要在鏡下控制，分化到膠原纖維呈淡紅色。纖維呈紅色即可。分化時間根據(jù)染色深淺而定。一般1-2min。
7、 返藍液常使用氨水水溶液，亦可自行配制Scoot 促藍液或0.1-1%碳酸鋰水溶液。
8、 戴一次性手套操作。
9、 使用場所應通風，并遠離火源。
儲存條件：
2-25℃ 避光
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